體外診斷qPCR引物及探針

作为分子诊断qPCR试剂盒中的核心原料，引物及探针的质量对于样本靶标检测的准确性，qPCR引物及探针起到了极其关键的作用。而对于分子诊断的应用，需要对引物及探针的纯度、荧光强度和洁净度等一系列指标提出更高的要求。自以qPCR技术为基础的分子诊断应用在国内外兴起开始，生工生物即不断对生产工艺进行优化升级。目前，我们生产的引物及探针，已被国内外大量的分子诊断试剂盒生产商采用。

我們的優勢

 

1. 專用於生產分子診斷應用產品的10萬級潔凈生產車間和實驗室，其中上海總部獲得獲得了ISO 13485和GMP認證；
2. 專門經過優化的HPLC_CE (IVD)純化，在保證純度的前提下，避免外源性汙染；
3. 可選擇額外定製QC檢測：qPCR 探針熒光檢測、NTC檢測及關鍵指標批次間差異檢測；
4. 建立周期性質量跟蹤體系並定期出具質量跟蹤報告。

訂購信息

包含一對正反義鏈，常規情況下不帶修飾。IVD專用的 qPCR引物全部在符合醫藥診斷級的10萬級潔凈車間生產及純化，可選擇多種純化方式，推薦專門針對IVD優化的HPLC_CE (IVD)純化。

備註：

*HPLC_CE (IVD)為推薦純化方式，如需考慮成本，也可考慮ULTRAPAGE及標準HPLC純化方式，如對引物純度要求更高，則可選擇2X HPLC純化方式。選擇這些純化方式的引物均保證在符合醫藥診斷級的標準的10萬級潔凈車間內生產；

**如引物長度在堿基範圍之外，請在訂購前與技術支持進行咨詢溝通。

通常為一條雙端分別修飾熒光和淬滅基團的單鏈DNA，其中也包含具有雙重淬滅保障的雙淬滅熒光探針。IVD專用的 qPCR引物全部在符合醫藥診斷級的10萬級潔凈車間生產及純化，推薦專門針對IVD優化的HPLC_CE (IVD)純化，可在保證純度的基礎上有效避免外源性汙染。

備註：

*HPLC_CE (IVD)為推薦純化方式，如需考慮成本，也可考慮標準HPLC純化方式，如對引物純度要求更高，則可選擇2X HPLC。選擇這些純化方式的引物均保證按醫藥診斷級的標準在10萬級潔凈車間安排生產；

**如引物長度在堿基範圍之外，請在訂購前與技術支持進行咨詢溝通。

質量控製

除標準質檢外，針對於IVD qPCR應用的熒光探針，我們可以通過額外定製QC檢測來給予進一步的質量保證。

熒光值酶切增量（FLU）：確保TaqMan探針、分子信標等常規雙標記引物的熒光、淬滅基團功能完全正常。

                            

 

酶切增量檢測案例

對照組由於不含DNase I，雙標記探針保持完整，熒光基團被淬滅，只檢測到本底熒光值195.1；酶切組中

由於含有DNase I，雙標記探針被水解，熒光基團脫離淬滅範圍，檢測到明顯的熒光增強，熒光值達到

11486.9，為本底熒光的58.9倍，符合客戶定製的質控標準。

人源汙染檢測（HSC）：避免引物汙染有人gDNA。

 

            

HSC擴增檢測案例

使用常規人源DNA對應的引物、探針，將待測Oligo作為模板，配製擴增體系，進行qPCR檢測，檢測擴增曲線

及對應Ct值。A：45個反應循環內擴增曲線呈平線，系統判斷無Ct值，則說明引物探針純凈，無人源模板汙染；

B：45個循環內，擴增曲線出現翹起，系統判斷出Ct值，則說明引物探針有人源基因組DNA汙染。

無模板對照檢測（NTC）：杜絕陰性對照出現假陽性。

                   

NTC擴增檢測案例

將訂單中引物探針配製為qPCR體系，使用水作為模板，進行探針法qPCR反應，通過反應的擴增曲線及系統記錄Ct

值，判斷引物探針中是否有模板汙染。A：若45個循環內，擴增曲線為平線，系統判斷無Ct值，則說明引物探針純

凈，無模板汙染；B：若45個循環內，擴增曲線出現翹起，系統判斷出Ct值，則說明引物探針有模板汙染。